描述:C0260-117 Hoechst 33258,別稱為bisBenzimide H 33258 或HOE 33258,是一種可以穿透細(xì)胞膜,標(biāo)記DNA的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。
保存條件 保質(zhì)期
-20℃ 12個(gè)月
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商更新時(shí)間
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+品牌 | CellWorld | 貨號(hào) | C0260-117 |
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規(guī)格 | 1ml | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 實(shí)驗(yàn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
Hoechst 33342 染色液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)雙染的方法以區(qū)分凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的試劑盒。其檢測(cè)原理是:細(xì)胞核熒光染料Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜,嵌入雙鏈DNA后釋放藍(lán)色熒光。對(duì)于正常細(xì)胞,其可少許進(jìn)入細(xì)胞膜使其染上低藍(lán)色。而凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性增強(qiáng),從而使得進(jìn)入凋亡細(xì)胞內(nèi)的Hoechst 33342明顯多于正常細(xì)胞,熒光強(qiáng)度比正常細(xì)胞要高。另外,細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)染色質(zhì)會(huì)固縮,從而使得染料能更有效和聚集的結(jié)合于DNA,并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損而不能有效的將Hoechst 33342排除到細(xì)胞外使其在細(xì)胞內(nèi)的積累增加,這些特征都使得凋亡細(xì)胞經(jīng)染色后熒光會(huì)比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。但細(xì)胞核熒光染料PI不能穿透細(xì)胞膜完整的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞,即活細(xì)胞對(duì)PI染料拒染。而對(duì)于壞死細(xì)胞,其細(xì)胞膜的完整性在早期即已喪失,可被PI染色。
產(chǎn)品描述:
本產(chǎn)品為液體(1X)染色液,已經(jīng)過(guò) 0.1μm過(guò)濾,不含細(xì)菌、支原體等。
濃度:1mg/mL
規(guī)格: 1ml/支
有效期: 12個(gè)月
儲(chǔ)存溫度: -20℃
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸
使用說(shuō)明
Hoechst 33342 使用介紹:
※ Hoechst 33342也被稱為:bisBenzimide H33342 或者 HOE33342。
※ Hoechst 33342 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料產(chǎn)品,對(duì)細(xì)胞的毒性相對(duì)較低。
※ Hoechst 33342 染色經(jīng)常用在細(xì)胞凋亡檢測(cè)過(guò)程中使用,染色后可采用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察或采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33342 也可用于普通細(xì)胞核染色使用或DNA染色過(guò)程使用。
※ Hoechst 33342 的最大激發(fā)波長(zhǎng):346nm,最大發(fā)射波長(zhǎng):460nm;Hoechst 33342 和 雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合后的最大激發(fā)波長(zhǎng):350nm,最大發(fā)射波長(zhǎng):461nm。
※ Hoechst 33342可溶于水,溶解度可以達(dá)到 20mg/ml。
※ 用于細(xì)胞核染色過(guò)程時(shí),Hoechst 33342的工作濃度是:0.5-10ug/ml。Hoechst 33342 熒光染料能少許進(jìn)入細(xì)胞膜中,使喜寶媽們?nèi)旧系退{(lán)色,然而 凋亡細(xì)胞膜通透性增強(qiáng),所以進(jìn)入凋亡細(xì)胞的 Hoechst 33342 要比正常細(xì)胞的量大,凋亡細(xì)胞熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞的高,除此之外,凋亡細(xì)胞的染色體DNA 結(jié)構(gòu)發(fā)生改變后,使該染料可以更有效的與 DNA 進(jìn)行結(jié)合,且凋亡細(xì)胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受到損傷后不可以有效的將 Hoechst 33342 排出到細(xì)胞外,使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加,都會(huì)讓凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。然而 PI染料 是不能進(jìn)入到細(xì)胞膜完整的正常細(xì)胞以及凋亡細(xì)胞中,所以活細(xì)胞對(duì) PI染料拒染,但壞死細(xì)胞由于膜完整性在早期已經(jīng)被破損,所以是可以被PI染料進(jìn)行染色的。根據(jù)以上特性,用 Hoechst 33342 結(jié)合 PI染料對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行雙染色,就可以在流式細(xì)胞儀上將正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞以及壞死細(xì)胞進(jìn)行區(qū)別來(lái)。
※ 在雙變量流式細(xì)胞儀散點(diǎn)圖上,這三群細(xì)胞分別表現(xiàn)為:正常細(xì)胞為低藍(lán)色/低紅色(Hoechst 33342+/PI+),凋亡細(xì)胞為高藍(lán)色/低紅色(Hoechst 33342++/PI+),壞死細(xì)胞為低藍(lán)色/高紅色(Hoechst 33342+/PI++)。
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需戴好防護(hù)眼鏡,穿戴防護(hù)服和口罩,佩戴手套,避免與皮膚接觸。
2. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如遇到有毒或者刺激性物質(zhì)及有害物質(zhì)產(chǎn)生,必要時(shí)實(shí)驗(yàn)操作需要手套箱內(nèi)完成以免對(duì)實(shí)驗(yàn)人員造成傷害。
3. 取樣品的移液槍頭需及時(shí)更換,必要時(shí)為避免交叉污染盡可能選擇濾芯吸頭。
4. 稱量藥品時(shí)選用稱量紙,并無(wú)風(fēng)處取藥和稱量以免揚(yáng)撒,試劑的容器使用前務(wù)必確保干凈,并消毒。
5. 取藥品時(shí)盡量采用多個(gè)藥勺分別使用,使用后清洗干凈后,烘干消毒存放。
6. 實(shí)驗(yàn)后產(chǎn)生的廢棄物需分類存儲(chǔ),并交于專業(yè)生物廢氣物處理公司處理,以免造成環(huán)境污染。
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