纖維素酶的生產(chǎn)工藝主要有兩種,即固體發(fā)酵和液體發(fā)酵,其工藝如下:
影響產(chǎn)酶量和活力的因素
影響纖維素酶產(chǎn)量和活力的因素很多,除菌種外,還有培養(yǎng)溫度、pH、水分、基質(zhì)、培養(yǎng)時(shí)間等。這些因素不是孤立的,而是相互聯(lián)系的。張中良等(1997)采用均勻設(shè)計(jì)Cl12(1210),以綠色木霉(T.ViriclePers.expr)為菌種,研究了影響產(chǎn)纖維素酶的五大因素對(duì)產(chǎn)酶量和活力的作用,認(rèn)為基質(zhì)粗纖維含量為40%、初始pH7.5、加水4倍、在26-31℃條件下培養(yǎng)45h可獲得大產(chǎn)酶量26mg/g和CMC酶活力20mg/g·h。王成華等(1997)也研究了其誘變篩選的里氏木霉91-3的產(chǎn)酶條件,結(jié)果表明該菌種以7:3的秸稈粉和麥麩,另添加4%硫酸銨、0.4%磷酸二氫鉀、0.1%硫酸鎂為培養(yǎng)基,28-32℃為適宜培養(yǎng)溫度,30℃為溫度,4%為接種量,96h到達(dá)發(fā)酵高峰。張苓花等(1998)研究了以康氏木霉W-925為出發(fā)菌,經(jīng)誘變后得到的Wu-932纖維素酶高產(chǎn)菌的發(fā)酵條件。結(jié)果表明,以1:2的麥麩和稻草粉為培養(yǎng)基,5%的接種量,稻草粉碎平均長度3-5mm,初始pH4-5,溫度在28-35℃,發(fā)酵時(shí)間72h發(fā)酵條件。
污染菌的控制
飼用纖維素酶普遍存在一種俗稱的"白毛菌"污染。污染后輕者酶活性下降,重者發(fā)酵失敗。為此,研究控制發(fā)酵污染意義很大。張苓花等(1998)研究"白毛菌"的菌落特征、來源、生長和生理特征及控制方法,找到了一種與康氏木霉Wu-932呈共生關(guān)系,而與"白毛菌"呈競爭性抑制關(guān)系的熱帶假絲酵母菌J-931。利用此菌進(jìn)行混合發(fā)酵,可有效地控制"白毛菌"的污染。