HyClone胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質量。HyClone胎牛血清沉淀物是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,過濾分裝前很少會反復凍融,生產后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。
當然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。當然,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。我們總結血清沉淀融化三步驟,具體如下:
*步:室溫90min或者15-20°C水浴18min。
第二步:20°C水浴25min。
第三步:37°C水浴35min。
如果內有頭皮屑絮狀沉淀,說明脂蛋白和纖連蛋白析出,不會影響細胞培養(yǎng)狀態(tài)。
另外,我們建議您在使用HyClone胎牛血清的時候,注意下列的操作:
1.解凍HyClone胎牛血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
2.解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
3.請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
4.HyClone胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
5.若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
掌握以上內容,可以有效避免HyClone胎牛血清沉淀物的發(fā)生。